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  玻璃器具硅烷化 实验原理 一. 实验原理 玻璃表面存在硅醇基团(Si-OH),可对蛋白质等样品产生吸附,造成样品损 失。该类基团可用硅烷化法进行封闭处理,通过硅烷化试剂二甲基二氯硅烷或 六甲基二硅胺与载体表面进行反应,除去该类基团的氢键结合能力,以改善载 体表面的性能,减少对样品的吸附。在处理低浓度的特别“黏”的溶解物如单 链核酸或蛋白质时尤其重要。 二. 试剂器材 氯三甲基硅烷或二氯二甲基硅烷 真空泵 干燥器 三. 操作步骤 方法一: 方法一: 1. 2. 3. 配制含 6%二甲基二氯硅烷的甲醇溶液(硅烷化剂); 将玻璃器皿洗净(建议用重铬酸钾洗液浸泡清洗)、干燥; 在通风橱内将硅烷化剂倒入玻璃器皿内,使其接触器皿内表面并停留 10sec 以上。期间搅拌或振荡可使硅烷化剂与玻璃的反应更完全和均 匀; 4. 倒去硅烷化剂,用甲醇洗去过量的硅烷化剂,将玻璃器皿自然晾干,然 后 100℃加热 1hr。 方法二: 方法二: 1. 在通风橱内将要硅烷化的玻璃器具或仪器和装有 1-3ml 氯三甲基硅烷或 二氯二甲基硅烷的烧杯放入干燥器内。 氯三甲基硅烷和二氯二甲基硅烷蒸气有毒性且高度易燃。 氯三甲基硅烷和二氯二甲基硅烷蒸气有毒性且高度易燃。也可用溶于易挥发 的有机溶剂(如氯仿或庚烷) 5%的二氯二甲基硅溶液简要地冲洗 的二氯二甲基硅溶液简要地冲洗, 的有机溶剂(如氯仿或庚烷)中的约 5%的二氯二甲基硅溶液简要地冲洗,或 浸透其中,有机溶剂蒸发使二氯二甲基硅沉积在器具表面。 浸透其中,有机溶剂蒸发使二氯二甲基硅沉积在器具表面。 2. 将干燥器连接到真空泵上,直到硅烷开始沸腾,关闭泵连接维持干燥器 内真空,直到液体硅烷挥发完毕(约 1-3hr) 3. 在通风橱内打开干燥器,使硅烷蒸汽散掉。 4. 180℃烘烤玻璃器具或仪器 2hr。 注意事项: 四. 注意事项: 二甲基二氯硅烷有毒,易挥发、易燃,使用时应注意戴橡胶手套、 工作服及防护镜,并在防爆通风橱内进行; 二甲基二氯硅烷应避光密闭保存。长期存放会与水反应,并可自发 聚合,产生云雾状沉淀而降低有效成分,可通过滤纸过滤除去多聚 物; 玻璃器皿反应前务必干燥,可用 200℃干燥 15min; 当玻璃器皿重新变得亲水时表明硅烷化层已经破坏,需要重新处 理; 废弃硅烷化剂的处置:在硅烷化剂中加入水,然后按一般可燃液体 处置方法处理。