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闇练题及谜底

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三乙基氯硅烷分子式组织

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氯甲基二甲基氯硅烷的体

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化工原料三甲基氯硅烷[(

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三甲基一氯硅烷的简介

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硅氧烷是什么

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衍生化手段的生化试剂

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新型基因载体巯基烷基化壳聚糖的制备及体外性

  新型基因载体巯基烷基化壳聚糖的制备及体外性质的初步研究_基础医学_医药卫生_专业资料。目的制备巯基烷基化壳聚糖(TACS)载基因纳米粒,并对其体外相关性质进行初步研究。方法复凝聚法制备TACS/pDNA复合纳米粒子,并用透射电镜对其的形态和粒径进行观察和表征;凝胶阻滞分析观察其对基因的保护情况;以Lipofectamine2000转染试剂作为阳性对照,检测其对人胚胎肾细胞(HEK293)的转染活性;四噻氮唑盐(MTT)比色法测定其对细胞活性的影响。结果TACS/pDNA复合纳米

  ? 1 2? 6 安徽 医科大学学报 A £ f £ d c / e n n s M凰 A 2 0 p;4 2 c n 『 09A r ( ) 上 4 新型基因载体巯基烷基化壳聚糖的制备及体外性质的初步研究 白 欣 慕 , 摘要 目的 卿 李树 宝 张 , , 梅 何金 生 方月 娥 汪 春兰 赵 , , , , 宇 制备巯基 烷基化 壳聚 糖 ( A s 载基 因纳米 Tc ) 复凝 聚法制 粒, 并对其体外相关性质进行初步研究。方法 性 和低细胞 毒性等 优越 性 之 外 , 还具 有 独特 的跨 细 胞膜 能力 而 倍 受关 注J 。但 其 主要 不 足是 转 染 效 率较 低 , 以获得有 意义 的基 因表 达 , 难 限制 了其在基 备 T c /D A复 合 纳米 粒 子 , 用 透 射 电镜 对 其 的形 态 和 A sp N 并 粒径进行观察和表征 ; 凝胶 阻滞分析观察其对基 因的保 护情 况 ; Lpf t ie20 染 试 剂 作 为 阳性 对 照 , 测 其 对 以 i e a nO0转 ocm 检 人 胚 胎 肾细 胞 ( E 2 3 的转 染 活 性 ; 噻 氮 唑 盐 ( T) H K9 ) 四 M1 比 r 因递 送和 和基 因治 疗领域 的应用 。本研究通 过对壳 聚糖 的侧链 进行改 性 , 备 出新 型 的巯 基烷 基 化壳 制 聚 糖 ( A s 及 T c / D A复合 纳米 粒 子 , 对其 c ) A spN r 并 体外 相关性 质进行 了初步研 究 。 1 材料与 方法 色法测定其对细胞活性 的影响 。结果 T c / D A复合纳 A sp N 米粒 子 形 态 不 很均 一 , 粒径 在 3On 9 m左 右 ; 胶 阻 滞 分 析证 凝 明了载体能有效地包裹 和保护基因不受 D ae I酶的消化 ; Ns 体外 基 因转 染 实 验 证 实 了 T c A s纳 米 粒 子 能 够 有 效 地 转 染 H K9 , E 23 其转染效 率远 高于壳 聚糖 纳米 粒子 , 略低 于脂 质 体 ; I 测定其对细胞活力影 响甚微 , 细胞的毒性 明显低 Mr T r 对 于脂质体 。结论 体。 1 1 材料 . 快 速恒 温 数 显 水 浴 箱 ( 州 国华 电器 常 有 限公 司 ) 旋 涡 混 合 器 ( 京 全 北 德 工 贸 有 限公 ; 北 司 ) u 一0 0系列 紫外分 析仪和凝胶 数码成像 系统 ; V3 0 Tc A s有望成为一种有价值 的新型基 因载 ( m ) D Y8 He a ;Y 一B型稳 压 稳 流 电泳 仪 ( 京 六 一仪 北 遗传载体 ; 壳聚糖 ; 转染 纳 米 粒 子 主题词 自 由词 器 厂 )c 细胞 培养 箱 ( eau) 超 净工 作 台 ( ;O H res ; 苏 州 净化 设 备 公 司 ) EJ0 ; I80酶 标 仪 ( i-e) 倒 置 x BoT1 ; 荧 光显 微 镜 ( l u ) 人 胚 胎 肾细 胞 ( E<9 ) 0 mp s ; y HI 3、 2 p D A . -G P质粒 ( c N 3 1E F 由安徽 医科大 学免疫 实验 室 提 供 ) 壳 聚 糖 ( 江 玉 环 县 海 洋 生 物 化 学 有 限公 ; 浙 司 , 乙酰 度 9 % , 脱 1 相对 分子 量 2 0×1 ; 基 乙 . 0)巯 酸 ( l - ea) 5 5一 Af A sr ; , 二硫基 二硝基 苯 甲酸 ( l a , a El n m Sg a ; i ) 琼脂 糖 ( gms ) 溴化 乙锭 ( trSg a ; m Aa e ; EB ,im ) 中图 分 类 号 R3 9 3 R9 76 R96 3 R 3 80 4. ;7 . ; 1. ; 1.8 文 献 标 识 码 A 文 章 编 号 10 19 (0 9 0 0 6 0 o0— 42 20 )2— 12— 6 人 类基 因组 草 图的绘制完 成及深 入研究将 为基 因治疗 打下坚 实 的基础 , 因治疗 已成 为世 界 上 最 基 活跃 的研究领域 , 因治 疗 药 物将 对 医 药工 业 产 生 基 深远 的影 响 。 自从 A d r ne a 1 9 n es t l 9 0年 首 次成 o 功地进 行基 因治疗 的 临床 试验 以来 , 今 已完 成 了 迄 D M 培养基 ( i o ; ME Gb )胎牛 血清 ( yl e ; c H c n )脂质 体 0 ( isme0 0 Iv Ign ; 唑 蓝 与 二 甲 基 亚 砜 Lp0 2 0 ,ni1 e ) 噻 t D ( MS Sg a ; 它常 规 试 剂 为 进 口分 装 或 国产 D 0,im ) 其 分 析纯 。 1 2 实验 方法 . 50多例基 因治疗 临床试验 , 其 结果 尚不尽 人意 , 0 但 其最 大困难 在 于 开 发 无 毒 、 高效 的基 因 治疗 载 体 。 目前 , 用于递送 基 因 的基 因载 体 主要 有 病 毒载 体 和 非病 毒载体两 大类 , 者作 为一 种高 转 染效 率 载 体 前 已被研 究多 年 , 但病毒 载体有 一些 明显缺 点 , 引起 如 免疫反 应 、 病毒 野生 型 突变 、 在 致癌 性 等 , 全性 潜 安 差 。于是研究 者把 目光 转移 到安全无 毒而且 无免疫 原性 的非病毒 载体 。壳 聚糖作 为近年 来发展 起来 的 一 1 2 1 烷基 化 壳聚糖 的 制备 . . 参考 文 献 [ 4 的 3