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荧光检测器的特征

  ①灵敏度极高。荧光检测器的灵敏度比紫外-可见光检测器的灵敏度约高两个数量级,最小检测量可达10^(-13g)。这是因为在紫外吸收检测法中,被检测的信号A=lg(Io/I),即当样品浓度很低时,检测器所检测的是两个较大信号Io及I的微小差别;而在荧光检测法中,被检测的是叠加在很小背景上的荧光强度。荧光检测器是最灵敏的液相色谱检测器,特别适合于痕量分析。愈是常用的衡量检测器灵敏度的基准物质。另外,荧光检测器的灵敏度还可以用水的拉曼谱带的信噪比来衡量。

  ②良好的选择性。产生荧光的一个必要条件是该物质的分子具有能吸收激发光能量的吸收带,即物质分子具有一定的吸收结构;另外的条件是吸收了激发光能量之后的分子具有高的荧光效率。相对较少的分子具有大的足够检测的量子效率是荧光检测器高选择性的主要原因。在很多情况下,荧光检测器的高选择性能够避免不发荧光的成分的干扰,成为荧光检测的独特优点。图4-5-12, 中虽然紫外# 可见光检测器在265nm可以检测牛奶中的维生素B2,但却取激发波长265nm,发射波长520nm做荧光检测。因为基体成分在此条件下不存在干扰荧光,具有更准确的检测结果。

  ③线性范围较宽。线 !$+,虽然比紫外吸收检测器窄,但对大多数痕量分析,该线性范围已足够宽。在分析物质浓度较大时,发射强度由于内滤效应可能随浓度增加而降低。

  对通常发生在荧光测量中的一些干扰非常敏感,如背景荧光和猝灭效应等。虽然这些干扰在液相分析中不经常遇到,但在进行定量分析时,有必要验证这些干扰是否存在,以及对样品测定的影响程度。尤其对某些物质,如卤素离子、重金属离子、氧分子及硝基化合物等,都应予以特别注意。